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電泳儀的原理和使用
發(fā)布日期: 2023/2/17 8:48:05

電泳儀是實(shí)現(xiàn)電泳分析的儀器,一般由電源、電泳槽、檢測(cè)單元等組成。所謂電泳,是指帶電粒子在電場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng),不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,在電場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)速度也不同,據(jù)此可以對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組分分析或單個(gè)組分提取制備。
發(fā)展歷史
自從1946年瑞典物理化學(xué)家Tiselius教授研制的第一臺(tái)商品化移界電泳系統(tǒng)問世以來,電泳分析儀發(fā)展極其迅速。特別是隨著支持介質(zhì)的更新,各種各樣的電泳分析裝置相繼推出,以適應(yīng)不同國家實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行教學(xué)、臨床和科研工作的需要。20世紀(jì)70年代以來,已有越來越多的自動(dòng)化電泳分析儀相繼被引入臨床實(shí)驗(yàn)室,并在各種疾病的臨床診治中發(fā)揮著越來越重要的作用。
1.早期階段(1970年以前)支持介質(zhì)有醋酸纖維素薄膜(簡稱醋纖膜)及瓊脂糖凝膠兩大類,這一時(shí)期的電泳分析儀多用于蛋白質(zhì)如血清蛋白、脂蛋白、血紅蛋白等項(xiàng)目分析。
2. 中期階段(1970—1990)這一時(shí)期電泳分析儀主要是可見光/熒光雙系統(tǒng)自動(dòng)電泳掃描儀,熒光試劑與熒光掃描儀的推出,在臨床上極大地方便了乳酸脫氫酶(LD)和肌酸激酶(CK)同工酶的測(cè)定。
3. 發(fā)展階段(1990年至今)這一時(shí)期電泳分析儀以自動(dòng)化為最大變化特點(diǎn)。常見有全自動(dòng)熒光/可見光雙系統(tǒng)電泳儀、全自動(dòng)醋纖膜電泳儀、全自動(dòng)瓊脂糖電泳儀等幾類。
工作原理
在溶液中能吸附帶電質(zhì)點(diǎn)或本身帶有可解離基團(tuán)的物質(zhì)顆粒,如核酸、蛋白質(zhì)、氨基酸等,在一定的pH值條件下,于直流電場(chǎng)中必然會(huì)受到電性相反的電極吸引而發(fā)生移動(dòng)。不同物質(zhì)的顆粒在電場(chǎng)中的移動(dòng)速度除與其帶電狀態(tài)和電場(chǎng)強(qiáng)度有關(guān)外,還與顆粒的大小、形狀和介質(zhì)黏度有關(guān)。根據(jù)這一特征,應(yīng)用電泳法便可以對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組分分析或單個(gè)組分提取制備,電泳儀正是基于上述原理設(shè)計(jì)制造的。
使用注意事項(xiàng)
1. 電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應(yīng)先斷電,以免觸電。同時(shí)要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2. 儀器通電后,不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。
3. 由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,電泳時(shí)所通過的電流量也不同,其泳動(dòng)速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。
4. 在總電流不超過儀器額定電流時(shí)(最大電流范圍),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5. 某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時(shí),允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機(jī),但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開機(jī),否則電壓表指針將大幅度跳動(dòng),容易造成不必要的人為機(jī)器損壞。

6. 使用過程中發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,以免發(fā)生意外事故。

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