酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀,是酶聯(lián)免疫吸附試驗的專用儀器??珊唵蔚胤譃榘胱詣雍腿詣?大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來分析抗原或抗體的含量。
酶標(biāo)法是什么
酶聯(lián)免疫吸附試驗方法簡稱酶標(biāo)法,是標(biāo)記技術(shù)中的一種,是從熒光抗體技術(shù),同位素免疫技術(shù)發(fā)展而來的一種敏感,特異,快速并且能自動化的現(xiàn)代技術(shù)。
酶標(biāo)法的基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯(lián)劑結(jié)合為酶標(biāo)抗原或抗體,此酶標(biāo)抗原或抗體可與固相載體上或組織內(nèi)相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生特異反應(yīng),并牢固地結(jié)合形成仍保持活性的免疫復(fù)合物。當(dāng)加入相應(yīng)底物時,底物被酶催化而呈現(xiàn)出相應(yīng)反應(yīng)顏色。顏色深淺與相應(yīng)抗原或抗體含量成正比。
由于此技術(shù)是建立在抗原-抗體反應(yīng)和酶的高效催化作用的基礎(chǔ)上,因此,具有高度的靈敏性和特異性,是一種極富生命力的免疫學(xué)試驗技術(shù)。
酶標(biāo)儀的原理
酶標(biāo)儀就是應(yīng)用酶標(biāo)法原理的儀器,酶標(biāo)儀類似于一臺變相光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。
光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本.該單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號,電信號經(jīng)前置放大,對數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計算,最后由顯示器和打印機顯示結(jié)果。
微處理機還通過控制電路控制機械驅(qū)動機構(gòu)X方向和Y方向的運動來移動微孔板,從而實現(xiàn)自動進(jìn)樣檢測過程。而另一些酶標(biāo)儀則是采用手工移動微孔板進(jìn)行檢測,因此省去了X,Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡單。
微孔板是一種經(jīng)事先包理專用于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。其常見規(guī)格有40孔板,55孔板,96孔板等多種,不同的儀器選用不同規(guī)格的孔板,對其可進(jìn)行一孔一孔地檢測或一排一排地檢測。
酶標(biāo)儀測定是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。隨著檢測方式的發(fā)展,擁有多種檢測模式的單體臺式酶標(biāo)儀叫做多功能酶標(biāo)儀,可檢測吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學(xué)發(fā)光(Lum)。
酶標(biāo)儀從原理上可以分為光柵型酶標(biāo)儀和濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型酶標(biāo)儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的任意波長,而濾光片型酶標(biāo)儀則根據(jù)選配的濾光片,只能截取特定波長進(jìn)行檢測。
酶標(biāo)儀的結(jié)構(gòu)
酶標(biāo)儀所用的單色光既可通過相干濾光片來獲得,也可用分光光度計相同的單色器來得到。在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣,濾光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,其效果是相同的。光源燈發(fā)出的光經(jīng)聚光鏡,光欄后到達(dá)反射鏡,經(jīng)反射鏡作90°反射后垂直通過比色溶液,然后再經(jīng)濾光片送到光電管。
酶標(biāo)儀可分為單通道和多通道2種類型,單通道又有自動和手動2種之分。自動型的儀器有X,Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu),可將微孔板L的小孔一個個依次送入光束下面測試,手動型則靠手工移動微孔板來進(jìn)行測量。
在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上又發(fā)展了多通道酶標(biāo)儀,此類酶標(biāo)儀一般都是自動化型的。它設(shè)有多個光束和多個光電檢測器,如12個通道的儀器設(shè)有12條光束或12個光,12個檢測器和12個放大器,在X方向的機械驅(qū)動裝置的作用下,樣品12個為一排被檢測。多通道酶標(biāo)儀的檢測速度快,但其結(jié)構(gòu)較復(fù)雜價格也較高。
多功能酶標(biāo)儀
多功能酶標(biāo)儀指擁有多種檢測模式的單體臺式酶標(biāo)儀。通常具有比色皿插槽,可檢測吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學(xué)發(fā)光(Lum)??蓪σ晕⒖装鍨轶w系的實驗提供多種不同模式的檢測。通常,多功能酶標(biāo)儀至少可提供吸收光、熒光、發(fā)光三種不同的檢測模式。一些中高端多功能酶標(biāo)儀還可完成時間分辨熒光、熒光偏振、熒光共振能量轉(zhuǎn)移”等高級熒光檢測實驗。該儀聲明:本文章來源的稿件均為轉(zhuǎn)載,僅用于分享,如涉及版權(quán)等問題,請盡快聯(lián)系我們,我們第一時間更正,謝謝!器適用于臨床檢驗、微生物學(xué)、流行病學(xué)、免疫學(xué)、內(nèi)分泌學(xué)以及農(nóng)林科學(xué)等領(lǐng)域。廣泛用于醫(yī)院、血站、防疫站、生物制品等部門。
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